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| 結核病原菌。形狀細長,兩端圓形,微彎或筆直,抵抗力很大。一般是單個散布,侵入人體或動物體的組織後,即發生結核。 |
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結核桿菌(mycobecterium tuberculosis)引起結核病。對人類致病的有人型結核桿菌和牛型結核桿菌,非典型分枝桿菌也可引起類似結核樣病變,但少見。結核桿菌屬於放綫菌目分支桿菌科分支桿菌屬。該菌生長緩慢,人工培養最快要經2--4周才能在培養基表面看到菌落生長;抗結核治療後菌活力衰退,培養時需6--8周甚至20周後纔出現菌落。塗片染色具有抗酸性,即對苯胺染料、特別是石炭酸復紅具有獨特親合力,一經染色,再用酸性酒精衝洗無法使之脫色,故又稱之為抗酸桿菌。結核菌分五個類型,即人型、牛型、鳥型、鼠型和冷血動物型。其中對人致病的主要是人型菌,牛型菌感染較少見,鳥型菌感染更少見。與其它常見的細菌比較,結核桿菌的生長代謝緩慢,並且在自然環境不利的情況下,結核桿菌具有很強的生存能力:常見的細菌一般10-30分種就能繁殖一代,而結核桿菌則需要12-24小時才能繁殖—代,由此可見結核桿菌的生長代謝比潰兇的細菌緩慢的多。另外,結核桿菌的細菌結構比較特殊,因此造成它能夠在不利的自然環境中存活。結核桿菌在低溫環境中(如3℃),可存活6-12月;對常見的、用於消毒的化學物質如0.5%來蘇水、5%石灰酸溶液、0.1%過氧乙酸溶液等,痰標本中的結核桿菌可耐受—個小時以上。但70%的酒精能夠比較迅速的殺滅結核桿菌,同時,良好的通風和充分的陽光照能夠有效清除房間和附着在日用品上的結核桿菌。 其次,人體免疫係統不能完全殺滅進入人體內的結核桿菌。一般的細菌一旦進入健康人的血液,人體免疫細胞能夠迅速予以識別並將其吞噬但進入健康人血液的一部分結核桿菌,被吞噬後不能被融解,衹能受人體的免疫力抑製,不能進一步繁殖而引起發病,這時的結核桿菌是一種“休眠”狀態寄生在人體組織的細胞中。當人體免疫力下降時,處於“休眠”的結核桿菌就能夠進行大量繁殖,從而引起相應組織發病。另外,大多數常用的抗菌不能有效殺滅已造成人體感染的結核桿菌,儘管目前已發展能夠治療細菌性感染的抗菌素種類很多,並且正在不斷增加,但能夠對結核桿菌進行有效的殺滅或抑製的抗菌素種類衹有十幾種。即使對結核桿菌有效的抗菌素,如果僅用一、兩種,結核桿菌也很容易對相應藥物産生耐藥性,給治療帶來麻煩。
一、生物學性狀
(一)形態染色
結核桿菌細長略彎麯,端極鈍園,大小約1~4×0.4um ,呈單個或分枝狀排列,無莢膜、無鞭毛、無芽胞。在陳舊的病竈和培養物中,形態常不典型,可呈顆粒狀,串球狀,短棒狀,長絲形等。結核桿菌一般常用萎~~鈉氏(ziehl-neelsen)抗酸性染色法染色,結核桿菌染成紅色,其他非抗酸性細菌及細胞漿質等呈藍色。結核桿菌的抗酸性取决於胞壁內所含分枝菌酸殘基和胞壁固有層的完整性有關。
(二)培養特性
結核桿菌為專性需氧菌。營養要求高,在含有蛋黃、馬鈐薯、甘油和天門鼕素等的固體培養基上才能生長。最適ph 6.5~6.8 ,最適溫度為37℃,生長緩慢,接種後培養3~4周纔出現肉眼可見的菌落。菌落為乾燥、堅硬、表面呈顆粒狀、乳酪色或黃色,形似菜花樣。在液體培養內呈粗糙皺紋狀菌膜生長,若在液體培養基內加入水溶性脂肪酸,如tween~80,可降低結核桿菌表面的疏水性,使呈均勻分散生長,此有利於作藥物敏感試驗等。
(三)抵抗力
結核桿菌對某些理化因子的抵抗力較強。在幹痰中存活6~8個月,若粘附於塵埃上,保持傳染性8~10天。在3%hci或naoh溶液中能耐受30分鐘,因而常以酸礆中和處理嚴重污染的檢材,殺死雜菌和消化粘稠物質,提高檢出率。但對濕熱、紫外綫、酒精的抵抗力弱。在液體中加熱62~63℃15分鐘,直射日光下2~3小時,75%酒精內數分鐘即死亡。
(四)變異性
結核桿菌對鏈黴素、利福平、異煙肼等抗結核藥物較易産生耐藥性。耐藥菌菌株常伴隨活力和毒力減弱,如異煙肼耐藥菌株對豚鼠的毒力消失,但對人們仍有一定的致病性。
卡~~介(calmette-gerine)二氏將牛型結核桿菌培養於膽汁、甘油、馬鈴薯培養基中,經230次傳代,歷時13年,使其毒力發生變異,成為對人無致病性,而仍保持良好免疫性的菌苗株,稱為卡介菌(bacilli calmette-giierin,bcg)。卡介菌接種人體後,可獲得抗結核受疫力。
(五)菌體成份與作用
結核桿菌無內毒素,也不産生外毒素和侵襲性酶類,其致病作用主要靠菌體成份,特別是胞壁中所含的大量脂質。脂質含量與結核桿菌的毒力呈平行關係,含量愈高毒力愈強。
1.脂質(lipide):脂質占菌體幹的20~40%,占胞壁幹重的60%,主要是磷脂、脂肪酸和蠟質,它們大多與蛋白質或多糖質結合成復合物存在。①磷脂能刺激單核細胞增生,並可抑製蛋白酶的分解作用,使病竈組織溶解不完全,形成幹酷樣壞死。②脂肪酸在脂質中比重較大,其中6,6~二分枝酰~a,a'~海澡糖(6,6~dimycocyl~a,a'~d~trehalose)具有破壞細胞綫粒體膜,毒害微粒體酶類,抑製中性粒細胞遊走和吞噬作用,引起慢性肉牙腫。具有該物質的結核桿菌毒株,在液體培養基中能緊密粘成索狀,故稱為索狀因子(cordfactor)。③蠟質d為胞壁中的主要成分,是一種肽糖脂(piptidoglycolipids)與分枝菌酸(my-colic acid)復合物,能引起遲發型變態反應,並具有佐劑作用。④硫酸腦苷脂(salfatides)和硫酸多酰基化海澡糖(multiasiylated trehalose salfate)在結核桿菌毒株胞壁中含有,能抑製吞噬細胞中的吞噬體與溶酶體融合,使結核桿菌在細胞內存活。這一類糖脂能結合中性紅染料。産生中性紅反應,藉此可鑒定結核桿菌有無毒力。
2.蛋白質(protein):結核桿菌菌體內都含有數種蛋白質,其中重要的蛋白質是結核菌素(tuberculin)。結核茵素與蠟質d結合,能引起較強的遲發型變態反應。其他蛋白質可引起機體産生相應的抗體,但無保護作用。
3.多糖質(polysuccharides):多糖質常與脂質結合存在於胞壁中,主要有半乳糖,甘露醇、阿拉拍糖等。多糖質可使中性粒細胞增多,引起局部病竈細胞浸潤。
4.核酸(nucleic acid):結核桿菌的核糖體核糖核酸(ribonucleie acid ribosonic, rrna)是本菌的免疫原,刺激機體産生特異性細胞免疫。
二、致病性
結核桿菌的致病作用可能是細菌在組織細胞內頑強增殖引起炎癥反應,以及誘導機體産生遲發型變態反應性損傷有關。結核桿菌可通過呼吸道、消化道和破損的皮膚粘膜進入機體,侵犯多種組織器官,引起相應器官,引起相應器官的結核病,其中以肺結核最常見。人類肺結核有兩種表現類型。
(一)原發感染
原發感染是首次感染結核桿菌,多見於兒童。結核桿菌隨同飛沫和塵埃通過呼吸道進入肺泡,被巨噬細胞吞噬後,由於細菌胞壁的碳酸腦苷脂抑製吞噬體與溶酶體結合,不能發揮殺菌溶菌作用,致使結核桿菌在細胞內大量生長繁殖,最終導致細胞死亡崩解,釋放出的結核桿菌或在細胞外繁殖侵害,或被另一巨噬細胞吞噬再重複上述過程,如此反復引起滲出性炎癥病竈,稱為原發竈。原發竈內的結核桿菌可經淋巴管擴散在肺門淋巴結,引起淋巴管炎和淋巴結腫大,x綫胸片顯示啞鈴狀陰影,稱為原發綜合徵。隨着機體抗結核免疫力的建立,原發竈大多可纖維給的鈣化而自愈。但原發竈內可長期潛伏少量結核桿菌,不斷刺激機體強化已建立起的抗結核免疫力,也可作為以後內源性感染的來源。衹有極少數免疫力低下者,結核桿菌可經淋巴、血流擴散至全身,導致全身粟粒性結核或結核性腦膜炎。
(二)繼發感染
繼發感染也稱原發後感染,多見於成年人。大多為內源性感染,極少由外源性感染所致。繼發性感染的特點是病竈局限,一般不纍及鄰近的淋巴結,主要表現為慢性肉芽腫性炎癥,形成結核結節,發生纖維化或幹酪樣壞死。病變常發生在肺尖部位。
三、免疫與變態反應
結核桿菌的免疫原rrna和變應原結核菌素可誘發機體産生由t淋巴細胞介導的兩種免疫應答反應,即細胞免疫和遲發型變態反應。
(一)免疫性
人類對結核桿菌的感染率很高,但發病率卻較低,這表明人體感染結核桿菌可獲得一定的抗結核免疫力。抗結核免疫力的持久性,依賴於結核桿菌在機體內的存活,一旦體內結核桿菌消亡,抗結核免疫力也隨之消失,這種免疫稱為有菌免疫或傳染性免疫(infection immunify)。
抗結核免疫主要是細胞免疫,包括緻敏的t淋巴細胞和被激活的巨噬細胞。緻敏的t淋巴細胞可直接殺死帶有結核桿菌的靶細胞,同時對釋放多種作用於世噬細胞的淋巴因子,使巨噬細胞聚集在病竈周圍形成以單核細胞為主的增生性炎癥。被激活的巨噬細胞極大地增強對結核桿菌的吞噬消化,抑製繁殖,阻止擴散,甚至銷毀的能力,充分分揮細胞免疫的作用。
(二)免疫與變態反應的關係
在結核桿菌感染時,細胞免疫與遲發型變態反應同時存在,此可用郭霍氏現象(koch's phenomenton)說明,①在健康豚鼠皮下首次註射一定量結核桿菌,10~14天後註射部位緩慢地出現潰瘍,深而不易愈合,鄰近淋巴結腫大,細菌擴散至全身,此時結核菌素測試為限性。②用相同等量的結核桿菌註入曾感染已康復的豚鼠皮下,在1~2天內即迅速發生潰瘍,但潰瘍淺而易愈合,鄰近淋巴結不腫大,細菌也很少擴散,結核菌素測試為陽性。③在康復的豚鼠皮下註射大量結核桿菌,則引起註射局部及全身嚴重的遲發型變態反應,甚至導致動物死亡。上述三種現象表明,首次感染出現的炎癥反應偏重於免疫預防,潰瘍淺而愈合,細菌不擴散,說明機體尚未建立起抗結核免疫力;再次感染發生的炎癥發應則偏重於免疫預防,潰瘍當淺而愈合,細菌不擴散,說明機體對結核桿菌已具有一定的細胞免疫力,而潰瘍迅速形成,則說明在産生免疫的同時有遲發型變態反應,表現出對機體有利的一面;用過量的結核桿菌進行再次感染,則引起劇烈的遲發型變態反應,說明遲發型變態反應對機體不利的一面。人類的原發性肺炎結核,繼發性肺結核,嚴重而惡化的肺結核,相當於郭霍氏現象的三種情況。
近年來,實驗研究證明結核桿菌細胞免疫與遲發型變態反應是由不同的t淋巴細胞亞群介導和不同的淋巴因子承擔的,是獨立存在的兩種反應。①從小鼠實驗表明,結核桿菌感染的細胞免疫應答為lytl+-2和lytl--2t淋巴細胞,而遲發型變態反應則為lytl+2t淋巴細胞。②取結核桿菌rrna免疫小鼠的t淋巴細胞與rrna共育的上清中不含巨噬細胞移動抑製結核桿菌繁殖抑製因子(myco if);但用結核桿菌減毒活菌標(h37rv)免疫小鼠的t淋巴細胞與ppd共育,其上清中則含有mif,而與h37rv共育的上清液不僅含有mif而且含有myco if。這兩種免疫小鼠都用結核桿菌強毒株攻擊,他們都獲得相等程度的免疫力,故認為抗結核細胞免疫是由myco if承擔,而與mif無關。
本試驗用於測定機體對結核桿菌有無變態反應。將一定是結核菌素註入皮內,如受試者曾感染結核桿菌,則在註射部位出現遲發型變態反應炎癥,是為陽性,未感染結核桿菌則為陰性。此法可用檢測可凝病人曾否感染結核菌,接種卡介苗後是否陽轉以及檢則機體細胞免疫功能。
結核菌素試驗一般使用舊結核菌素(old-tubercein簡稱ot),是結核桿菌在肉汽中培養物經加熱濃縮的濾液。主要成分是結核蛋白,也含有結核桿菌的其他代謝和培養基成分。稀釋1萬倍,0.1毫升內含有1個單位(稀釋1000倍,0.1ml 有10個單位),取ot結核蛋白純化後稱為精製純蛋白衍生物(purified protein derivative ,簡稱ppd ),取0.00002ml作為一個結核菌素單位,是現今國際製造的標準ppd,稱為ppd-s。試驗法常規使用5個單位ot(2000倍稀釋0.1ml)或ppd-s0.0001mg註入受試者前臂掌側皮內,48~72小時內出現紅腫硬節直徑大於5毫米者為陽性,雖有紅腫但無硬結或硬結直徑不到5毫米者為陰性。應註意受拭者處於原發感染早期,變態反應尚未發生,或正患嚴重的結核病如全身粟粒性結核和結核性腦膜炎時機無反應能力,或患其他嚴重疾病(麻疹、結節病、惡性腫瘤),如用過免疫抑製劑時,結核菌素反應均可轉為陰性。
四、微生物診斷
根據結核菌感染的類型,應采取病竈部位的適當標本。如肺炎結核有采取咯痰(最好取早晨第一次咯痰,挑取帶血或膿痰);腎或膀胱結核以無菌導尿或取中段尿液;腸結核采取糞便標本,結核性腦膜炎進行腰脊穿刺采取腦脊液;膿胸、肋膜炎、腹膜炎或骨髓結核等則穿刺取膿汁。
(一)直接塗片染色
咯痰可直接塗片。用萋~納氏法染色,若鏡檢找到抗酸性桿菌,可能是結核桿菌,但通常應報告:“查到抗酸性桿菌”,因標本中可能混雜有非致病性抗性抗酸桿菌,單憑形態染色不能確定是結核桿菌,需進一步分離培養鑒定。如標本中結核桿菌量少,雜菌和雜質多時,直接塗片不易檢出(一般需要每毫升痰液含有結核桿菌10萬個以上才能檢出),應濃縮集菌後,再塗片染色鏡檢,以提高檢出陽性率。
無菌直接采取的腦脊液、導尿或中段尿可直接用離心沉澱集菌。咯痰和糞便標本濃縮集菌因含雜功菌多,需用4%naoh或3%hcl或6%h2so4處理,然後,用離心沉澱法將結核桿菌濃縮聚集於管底,再取沉澱物塗片作抗酸染色檢查、分離培養或動物試驗。
(二)分離培養
結核桿菌生長緩慢,培養期長,當以酸鹼中和濃縮集菌的沉澱物,接種於固體培養基上,以蠟封口防止乾燥。37℃培養4~6周後檢查結果。根據生長緩慢,菌落乾燥、顆粒狀、乳酪色象菜花狀,菌體染色抗酸性強,多數為結核桿菌。如菌落、菌體染色都不典型,則可能為非典型分枝桿菌,應進一步作鑒別試驗。
(三)動物試驗
常用豚鼠或地鼠鑒別凝似結核桿菌的分離培養物和毒力測定。取經濃縮集菌處理的標本1.0毫升註射於豚鼠腹股溝皮下,經3~4周飼養觀察,如出現局部淋巴結腫大,消瘦或結核菌素試驗陽性,可及時剖檢:若觀察6~8周後,仍未見發病者,也要剖檢。剖檢時應註意觀察淋巴結、肝、脾、肺等髒器有無結核病變。
五、防治原則
(一)預防接種
卡介苗接種是預防結核病的有效措施之一,廣泛接種卡介苗能大大地降低結核病的發病率。根據統計調查未接種組的發病率比接種組高4~5倍,嬰兒因免疫力低,為卡介苗接種的主要對象。6個月以內健康兒童可直接接種,較大兒童須作結核菌素試驗,陰性者接種。一般在接種後6~8周如結核菌素試驗轉陽,則表示接種者已産生免疫力。試驗陰性者應再行接種。皮內接種卡介苗後,結素試驗轉陽率可達96~99%,陽性反應可維護5年左右。
(二)治療
結核病的治療在於控製疾病,促使病竈愈合,消除癥狀和防止復發。抗癆藥物有製菌作用,但它們仍須通過體內免疫機理而起作用。常用的藥物有異菸肼(inh)、鏈黴素、對氨水楊酸鈉(pas)、利福平、乙胺丁醇等。各種抗癆藥物如合併應用,有協同作用,且能降低耐藥性的産生,減少毒性。因耐藥菌株出現較多,因此由病人體內人分離的結核菌株在治療過程中應作藥敏試驗,以測定耐藥性的産生情況。
結核病是結核桿菌引起的一種呼吸道傳染病。多數患者是通過呼吸道感染的。結核桿菌在陰暗潮濕的環境中可以存活幾個月。當患有活動期肺結核的病人吐痰後,結核菌就可隨幹了的痰跡飛散到四周。隨時都可以感染健康人。人體除毛發外幾乎全身所有組織都可以感染結核病,入腸結核、骨結核、淋巴結核等。由於結核病主要經呼吸道進行傳播,因此肺結核的感染率比其他器官高,占人體結核病的首位。患結核病後,病人可有低燒、盜汗、疲乏無力、幹咳或痰中帶血絲、顔面潮紅、身體瘦弱等癥。如不及時徹底的治療,會使病情轉為慢性,甚至造成病人死亡。 |
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結核桿菌
Tubercle bacillus
引起人和動物結核病的病原菌。屬於分枝桿菌,具有抗酸性,長2~7μm(平均4μm),寬0.5μm,無芽胞、莢膜及鞭毛。在固體培養上生長緩慢。分為人型、牛型、鳥型、鼠型和冷血動物型等多型。人型主要侵害人、猿、猴;牛型侵害人、牛;鳥型、鼠型一般不引起人類疾病。人型菌與牛型菌都有對熱不穩定的觸酶,在溫度68℃經20分鐘即可滅活。結核桿菌主要通過呼吸道、消化道和受損的皮膚侵入易感機體而致病。
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- : Mycobacterium tuberculosis, Tubercle bacillus, TB
- n.: tubercle bacillus, mycobacterium trberculosis
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| 結核分枝桿菌 |
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| 結核桿菌抗體 | 結核桿菌培養 | | 副結核桿菌素 | 濃縮查結核桿菌 | | 精液結核桿菌培養 | 結核桿菌韓國錦湖 | | 集菌法查結核桿菌 | 結核桿菌抗體試驗 | | 結核桿菌豚鼠接種 | 痰塗片找結核桿菌 | | 結核桿菌抗體測定試劑 | 結核桿菌特異性抗體 | | 結核桿菌韓國錦湖鋼結構 | 結核桿菌韓國錦湖高交會館 | | 結核桿菌和國傢韓國 | 進口韓國開價很高句話概括結核桿菌客戶觀看 | | 結核桿菌看貨估價華冠科技公開價格計劃 | 結核桿菌快速藥敏及菌型鑒定 | |
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