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微生物測定法
microbiological assay
在規定條件下選用適當微生物測定某物質含量的方法。被測定的物質可以是某些生物生長所必需的維生素、氨基酸等,也可以是抑製某些微生物生長的抗生素、農藥等。常使用的有液體稀釋法和固體平板擴散法。
液體稀釋法在一組試管中分別加入一定的培養基,然後加入不等量的被測物質,再將已培養好的、用於測定的微生物接種進去,在規定的條件下培養一定時間,觀察其消長情況並與標準麯綫對比,計算出被測物質的含量。
固體平板擴散法將溶化的固體培養基與被測定微生物混合做成平板,把含不等量被測物質的液體滴入置於平板上(直接滴樣法);或註入平板上的牛津杯內(管碟法);或吸入圓形濾紙片後,再置於平板上(紙片法);也可以在平板上挖一定大小的圓孔,然後把被測物滴入孔內(打孔法);經培養後在物質擴散所及的範圍內出現抑菌法(或生長圈),測量圈的直徑,並與標準麯綫對比,計算出被測物質的含量(見圖[固體平板擴散法1、3、7 打孔法2、8紙片法4、6管碟法5直接滴樣法][])。
1932年,a.弗萊明在研究溶菌酶和青黴素時,開始使用微生物法測定抗生素的活性。1940年,e.b.錢恩等根據平板上抑菌圈的大小測定青黴素的活性含量。後又經e.p.亞伯拉罕等進一步將上述測定方法予以完善。測定抗生素時常用的微生物有大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、啤酒酵母、黑麯黴等。1935年,w.h.肖普費最先用微生物測定維生素b。1939年,e.e.斯內爾和f.m.斯特朗用乳桿菌測定維生素的含量。1934年,k.a.凱肯等用阿拉伯聚糖乳桿菌測定9種氨基酸。此後,乳桿菌屬、鏈球菌屬、明串珠菌屬的成員及某些微生物的變異株,逐漸成為最常使用的對象。
微生物測定法快速、簡便、靈敏度高,在醫藥、食品等工業中廣泛應用。 |