|
|
qīn hé céng xī (affinitychromatography) jiāng jù yòu tè shū jié gòu de qīn hé fènzǐ zhì chéng gùxiàng xī fù jì fàng zhì zài céng xī zhù zhōng， dāng yào bèi fēn lí de dàn bái hùn hé yè tōng guò céng xī zhù shí， yǔ xī fù jì jù yòu qīn hé néng lì de dàn bái zhì jiù huì bèi xī fù 'ér zhì liú zài céng xī zhù zhōng。 nà xiē méi yòu qīn hé lì de dàn bái zhì yóu yú bù bèi xī fù， zhí jiē liú chū， cóng 'ér yǔ bèi fēn lí de dàn bái zhì fēn kāi， rán hòu xuǎn yòng shìdàng de xǐ tuō yè， gǎi biàn jié hé tiáo jiàn jiāng bèi jié hé de dàn bái zhì xǐ tuō xià lái， zhè zhǒng fēn lí chún huà dàn bái zhì de fāng fǎ chēng wéi qīn hé céng xī 。
zài shēng wù fènzǐ zhōng yòu xiē fènzǐ de tè dìng jié gòu bù wèi néng gòu tóng qí tā fènzǐ xiāng hù shí bié bìng jié hé， rú méi yǔ dǐ wù de shí bié jié hé、 shòu tǐ yǔ pèi tǐ de shí bié jié hé、 kàng tǐ yǔ kàng yuán de shí bié jié hé， zhè zhǒng jié hé jì shì tè yì de， yòu shì kě nì de， gǎi biàn tiáo jiàn kě yǐ shǐ zhè zhǒng jié hé jiě chú。 shēng wù fènzǐ jiān de zhè zhǒng jié hé néng lì chēng wéi qīn hé lì。 qīn hé céng xī jiù shì gēn jù zhè yàng de yuán lǐ shè jì de dàn bái zhì fēn lí chún huà fāng fǎ。
lì yòng gòng jià lián jiē yòu tè yì pèi tǐ de céng xī jiè zhì fēn lí dàn bái zhì hùn hé wù zhōng néng tè yì jié hé pèi tǐ de mùdì dàn bái huò qí tā fènzǐ de céng xī jì shù。
（ yī） yuán lǐ
qīn hé céng xī shì yī zhǒng xī fù céng xī， kàng yuán（ huò kàng tǐ） hé xiāng yìng de kàng tǐ（ huò kàng yuán） fā shēng tè yì xìng jié hé， ér zhè zhǒng jié hé zài yī dìng de tiáo jiàn xià yòu shì kě nì de。 suǒ yǐ jiāng kàng yuán（ huò kàng tǐ） gùxiàng huà hòu， jiù kě yǐ shǐ cún zài yèxiàng zhōng de xiāng yìng kàng tǐ（ huò kàng yuán） xuǎn zé xìng dì jié hé zài gùxiàng zài tǐ shàng， jiè yǐ yǔ yèxiàng zhōng de qí tā dàn bái zhì fēn kāi， dá dào fēn lí tí chún de mùdì。
cǐ fǎ jù yòu gāo xiào、 kuài sù、 jiǎn biàn děng yōu diǎn。
（ èr） zài tǐ de jī běn yào qiú hé xuǎn zé
lǐ xiǎng de zài tǐ yìng jù yòu xià liè jī běn tiáo jiàn： ① bù róng yú shuǐ， dàn gāo dù qīn shuǐ； ② duò xìng wù zhì， fēi tè yì xìng xī fù shǎo； ③ jù yòu xiāng dāng liàng de huà xué jī tuán kě gōng huó huà； ④ lǐ huà xìng zhì wěn dìng； ⑤ jī xiè xìng néng hǎo， jù yòu yī dìng de kē lì xíng shì yǐ bǎo chí yī dìng de liú sù； ⑥ tōng tòu xìng hǎo， zuì hǎo wéi duō kǒng de wǎng zhuàng jié gòu， shǐ dà fēn zǐ néng zì yóu tōng guò； ⑦ néng dǐ kàng wēi shēng wù hé chún de zuò yòng。
kě yǐ zuò wéi gùxiàng zài tǐ de yòu zào tǔ、 bō lí wēi qiú、 shí yīng wēi qiú、 qiǎnɡ lín suān gài、 yǎng huà lǚ、 jù bǐng xī xiān 'àn níng jiāo、 diàn fěn níng jiāo、 pú jù táng níng jiāo、 xiān wéi sù hé qióng zhī táng。 zài zhè xiē zài tǐ zhōng， zào tǔ、 bō lí wēi qiú děng xī fù néng lì ruò， qiě bù néng fáng zhǐ fēi tè yì xìng xī fù。 xiān wéi sù de fēi tè yì xìng xī fù qiáng。 jù bǐng xī xiān 'àn níng jiāo shì mù qián de shǒu xuǎn yōu liáng zài tǐ。
qióng zhī táng níng jiāo de yōu diǎn shì qīn shuǐ xìng qiáng， lǐ huà xìng zhì wěn dìng， bù shòu xì jūn hé méi de zuò yòng， jù yòu shū sōng de wǎng zhuàng jié gòu， zài huǎn chōng yè lí zǐ nóng dù dà yú 0.05mol/l shí， duì dàn bái zhì jīhū méi yòu fēi tè yì xìng xī fù。 qióng zhī táng níng jiāo jí yì bèi xiù huà qīng huó huà， huó huà hòu xìng zhì wěn dìng， néng jīng shòu céng xī de gè zhǒng tiáo jiàn， rú 0.1mol/lnaoh huò 1mol/lhcl chǔlǐ 2h~3h jí dàn bái zhì biàn xìng jì 7mol/l niào sù huò 6mol/l yán suān guā chǔlǐ， bù yǐn qǐ xìng zhì gǎi biàn， gù yì yú zài shēng hé fǎn fù shǐ yòng。
qióng zhī táng níng jiāo wēi qiú de shāng pǐn míng wéi sepharose， hán táng nóng dù wéi 2%、 4%、 6% shí fēn bié chēng wéi 2b、 4b、 6b。 yīn wéi sepharose4b de jié gòu bǐ 6b shū sōng， ér xī fù róng liàng bǐ 2b dà， suǒ yǐ 4b yìng yòng zuì guǎng。 |
qīn hé céng xī (affinitychromatography) |
jiāng jù yòu tè shū jié gòu de qīn hé fènzǐ zhì chéng gùxiàng xī fù jì fàng zhì zài céng xī zhù zhōng， dāng yào bèi fēn lí de dàn bái hùn hé yè tōng guò céng xī zhù shí， yǔ xī fù jì jù yòu qīn hé néng lì de dàn bái zhì jiù huì bèi xī fù 'ér zhì liú zài céng xī zhù zhōng。 nà xiē méi yòu qīn hé lì de dàn bái zhì yóu yú bù bèi xī fù， zhí jiē liú chū， cóng 'ér yǔ bèi fēn lí de dàn bái zhì fēn kāi， rán hòu xuǎn yòng shìdàng de xǐ tuō yè， gǎi biàn jié hé tiáo jiàn jiāng bèi jié hé de dàn bái zhì xǐ tuō xià lái， zhè zhǒng fēn lí chún huà dàn bái zhì de fāng fǎ chēng wéi qīn hé céng xī 。
zài shēng wù fènzǐ zhōng yòu xiē fènzǐ de tè dìng jié gòu bù wèi néng gòu tóng qí tā fènzǐ xiāng hù shí bié bìng jié hé， rú méi yǔ dǐ wù de shí bié jié hé、 shòu tǐ yǔ pèi tǐ de shí bié jié hé、 kàng tǐ yǔ kàng yuán de shí bié jié hé， zhè zhǒng jié hé jì shì tè yì de， yòu shì kě nì de， gǎi biàn tiáo jiàn kě yǐ shǐ zhè zhǒng jié hé jiě chú。 shēng wù fènzǐ jiān de zhè zhǒng jié hé néng lì chēng wéi qīn hé lì。 qīn hé céng xī jiù shì gēn jù zhè yàng de yuán lǐ shè jì de dàn bái zhì fēn lí chún huà fāng fǎ。
lì yòng gòng jià lián jiē yòu tè yì pèi tǐ de céng xī jiè zhì fēn lí dàn bái zhì hùn hé wù zhōng néng tè yì jié hé pèi tǐ de mùdì dàn bái huò qí tā fènzǐ de céng xī jì shù。
（ yī） yuán lǐ
qīn hé céng xī shì yī zhǒng xī fù céng xī， kàng yuán（ huò kàng tǐ） hé xiāng yìng de kàng tǐ（ huò kàng yuán） fā shēng tè yì xìng jié hé， ér zhè zhǒng jié hé zài yī dìng de tiáo jiàn xià yòu shì kě nì de。 suǒ yǐ jiāng kàng yuán（ huò kàng tǐ） gùxiàng huà hòu， jiù kě yǐ shǐ cún zài yèxiàng zhōng de xiāng yìng kàng tǐ（ huò kàng yuán） xuǎn zé xìng dì jié hé zài gùxiàng zài tǐ shàng， jiè yǐ yǔ yèxiàng zhōng de qí tā dàn bái zhì fēn kāi， dá dào fēn lí tí chún de mùdì。
cǐ fǎ jù yòu gāo xiào、 kuài sù、 jiǎn biàn děng yōu diǎn。
（ èr） zài tǐ de jī běn yào qiú hé xuǎn zé
lǐ xiǎng de zài tǐ yìng jù yòu xià liè jī běn tiáo jiàn：① bù róng yú shuǐ， dàn gāo dù qīn shuǐ；② duò xìng wù zhì， fēi tè yì xìng xī fù shǎo；③ jù yòu xiāng dāng liàng de huà xué jī tuán kě gōng huó huà；④ lǐ huà xìng zhì wěn dìng；⑤ jī xiè xìng néng hǎo， jù yòu yī dìng de kē lì xíng shì yǐ bǎo chí yī dìng de liú sù；⑥ tōng tòu xìng hǎo， zuì hǎo wéi duō kǒng de wǎng zhuàng jié gòu， shǐ dà fēn zǐ néng zì yóu tōng guò；⑦ néng dǐ kàng wēi shēng wù hé chún de zuò yòng。
kě yǐ zuò wéi gùxiàng zài tǐ de yòu zào tǔ、 bō lí wēi qiú、 shí yīng wēi qiú、 qiǎnɡ lín suān gài、 yǎng huà lǚ、 jù bǐng xī xiān 'àn níng jiāo、 diàn fěn níng jiāo、 pú jù táng níng jiāo、 xiān wéi sù hé qióng zhī táng。 zài zhè xiē zài tǐ zhōng， zào tǔ、 bō lí wēi qiú děng xī fù néng lì ruò， qiě bù néng fáng zhǐ fēi tè yì xìng xī fù。 xiān wéi sù de fēi tè yì xìng xī fù qiáng。 jù bǐng xī xiān 'àn níng jiāo shì mù qián de shǒu xuǎn yōu liáng zài tǐ。
qióng zhī táng níng jiāo de yōu diǎn shì qīn shuǐ xìng qiáng， lǐ huà xìng zhì wěn dìng， bù shòu xì jūn hé méi de zuò yòng， jù yòu shū sōng de wǎng zhuàng jié gòu， zài huǎn chōng yè lí zǐ nóng dù dà yú 0.05Mol/L shí， duì dàn bái zhì jīhū méi yòu fēi tè yì xìng xī fù。 qióng zhī táng níng jiāo jí yì bèi xiù huà qīng huó huà， huó huà hòu xìng zhì wěn dìng， néng jīng shòu céng xī de gè zhǒng tiáo jiàn， rú 0.1Mol/LNaOH huò 1Mol/LHCl chǔlǐ 2h~3h jí dàn bái zhì biàn xìng jì 7Mol/L niào sù huò 6Mol/L yán suān guā chǔlǐ， bù yǐn qǐ xìng zhì gǎi biàn， gù yì yú zài shēng hé fǎn fù shǐ yòng。
qióng zhī táng níng jiāo wēi qiú de shāng pǐn míng wéi Sepharose， hán táng nóng dù wéi 2%、 4%、 6% shí fēn bié chēng wéi 2B、 4B、 6B。 yīn wéi Sepharose4B de jié gòu bǐ 6B shū sōng， ér xī fù róng liàng bǐ 2B dà， suǒ yǐ 4B yìng yòng zuì guǎng。
míng cí jiě shì :
qīn hé céng xī ： lì yòng gòng jià lián jiē yòu tè yì pèi tǐ de céng xī jiè zhì， fēn lí dàn bái zhì hùn hé wù zhōng néng tè yì jié hé pèi tǐ de mùdì dàn bái zhì huò qí tā fènzǐ de céng xī jì shù |
|
- n.: affinity chromatography
|
|
| ǒu lián | shì jì hé | shēng huà shì jì | |
|
|
| xì bāo qīn hé céng xī | miǎn yì qīn hé céng xī | |
|