|
|
yǔ dna bān diǎn zá jiāo lèi sì, měi gè yàng pǐn zhì duō jiā 10μg zǒng rna( jīng fēn / lǜ fǎng huò yì liú qíng suān guā tí qǔ chún huà)。 fāng fǎ shì jiāng rna róng yú 5μldepc shuǐ, jiā 15μl jiá quán /ssc huǎn chōng yè( 10×ssc zhōng hán 0.15mol/l jiá quán) shǐ rna biàn xìng。 rán hòu qǔ 5 ~ 8μl diǎn yàng yú chǔlǐ hǎo de lǜ mó shàng, hōng gān。
péi yǎng xì bāo, biāo běn chǔlǐ jì shù kě yǐ jiǎn huà, bù yòng tí qǔ hé chún huà rna。 fāng fǎ shì yòng hán 0.5%nonidetp40 de dī shèn huǎn chōng yè duì duō zhǒng dòng wù xì bāo zuò jiǎn dān chǔlǐ, lí xīn qù diào xì bāo hé hé xì bāo suì piàn, jiù dé dào jī běn bù dài dna 'ér fù hán rna de xì bāo zhì tí qǔ wù, zhè yī cū rna zài gāo yán xià yòng jiá quán biàn xìng, bù xū jiā gōng zhí jiē diǎn dào xiāo suān xiān wéi sù mó shàng。 běn fǎ kě yǐ kuài sù jiǎn cè dà liàng biāo běn, ér zhǐ xū jí shǎo liàng de xì bāo( 5×104) huò zǔ zhì。
zhěng gè rna shí yàn zhōng, yào fáng zhǐ jī huó nèi yuán xìng rnase, yòu xǔ duō zhǒng yù fáng cuò shī, yòu yī zhǒng shì zài yàng pǐn zhōng jiā rù hé táng hé gān yǎng fán jī fù hé wù( rvc)。 |
|
yǔ DNA bān diǎn zá jiāo lèi sì, měi gè yàng pǐn zhì duō jiā 10μg zǒng RNA( jīng fēn / lǜ fǎng huò yì liú qíng suān guā tí qǔ chún huà)。 fāng fǎ shì jiāng RNA róng yú 5μlDEPC shuǐ, jiā 15μl jiá quán /SSC huǎn chōng yè( 10×SSC zhōng hán 0.15mol/l jiá quán) shǐ RNA biàn xìng。 rán hòu qǔ 5~ 8μl diǎn yàng yú chǔlǐ hǎo de lǜ mó shàng, hōng gān。
péi yǎng xì bāo, biāo běn chǔlǐ jì shù kě yǐ jiǎn huà, bù yòng tí qǔ hé chún huà RNA。 fāng fǎ shì yòng hán 0.5%NonidetP40 de dī shèn huǎn chōng yè duì duō zhǒng dòng wù xì bāo zuò jiǎn dān chǔlǐ, lí xīn qù diào xì bāo hé hé xì bāo suì piàn, jiù dé dào jī běn bù dài DNA 'ér fù hán RNA de xì bāo zhì tí qǔ wù, zhè yī cū RNA zài gāo yán xià yòng jiá quán biàn xìng, bù xū jiā gōng zhí jiē diǎn dào xiāo suān xiān wéi sù mó shàng。 běn fǎ kě yǐ kuài sù jiǎn cè dà liàng biāo běn, ér zhǐ xū jí shǎo liàng de xì bāo( 5×104) huò zǔ zhì。
zhěng gè RNA shí yàn zhōng, yào fáng zhǐ jī huó nèi yuán xìng RNase, yòu xǔ duō zhǒng yù fáng cuò shī, yòu yī zhǒng shì zài yàng pǐn zhōng jiā rù hé táng hé gān yǎng fán jī fù hé wù( RVC)。 |