斑點雜交（dot blot）是將被檢標本點到膜上，烘烤固定。這種方法耗時短，可做半定量分析。一張膜上可同時檢測多個樣品，為使點樣準確方便，市售有多種多管吸印儀（manifold），如minifoldⅠ和Ⅱ、bio-dot(bio-rad)和hybri-dot，它們有許多孔，樣品加到孔中，在負壓下就會流到膜上呈斑點狀或狹縫狀。反復衝洗進樣孔，取出膜烤幹或紫外綫照射以固定標本，這時的膜就可以進行雜交。
（1）dna斑點雜交：
①先將膜在水中浸濕，再放到15×ssc中。
②將dna樣品溶於水或te，煮沸5min，冰中速冷。
③用鉛筆在濾膜上標好位置,將dna點樣於膜上,每個樣品一般點5μl(2~10μg dna)。
④將膜烘幹，密封保存備用。
（2）rna斑點雜交：與上法類似，每個樣品至多加10μg總rna（經酚/氯仿或異硫氰酸胍提取純化），方法是將rna溶於5μl depc水，加5μl甲醛/ssc緩衝液（10×ssc中含6.15mol/l甲醛），使rna變性，然後取5-8μl點樣於處理好的濾膜上，烘幹。
（3）完整細胞斑點雜交：應用類似檢測細菌菌落的方法，可以對細胞培養物的特異序列進行快速檢測，將整個細胞點到膜上，經naoh處理，使dna暴露、變性和固定，再按常規方法進行雜交與檢測。有人曾用此法從105個培養細胞中檢測到至少5pg的epstein-barr病毒dna。完整細胞斑點印跡法可以用於篩選大量標本，因為它使細胞直接在膜上溶解，所以dna含量甚至比常用的提取法還高，又不影響與32p標記的探針雜交，但它不適用於非放射性標記探針，因為dna純度不夠，會産生高本底。 |
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