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微生物测定法
microbiological assay
在规定条件下选用适当微生物测定某物质含量的方法。被测定的物质可以是某些生物生长所必需的维生素、氨基酸等，也可以是抑制某些微生物生长的抗生素、农药等。常使用的有液体稀释法和固体平板扩散法。
液体稀释法在一组试管中分别加入一定的培养基，然后加入不等量的被测物质，再将已培养好的、用于测定的微生物接种进去,在规定的条件下培养一定时间,观察其消长情况并与标准曲线对比，计算出被测物质的含量。
固体平板扩散法将溶化的固体培养基与被测定微生物混合做成平板，把含不等量被测物质的液体滴入置于平板上(直接滴样法)；或注入平板上的牛津杯内（管碟法）；或吸入圆形滤纸片后，再置于平板上(纸片法)；也可以在平板上挖一定大小的圆孔，然后把被测物滴入孔内（打孔法）；经培养后在物质扩散所及的范围内出现抑菌法（或生长圈）,测量圈的直径,并与标准曲线对比,计算出被测物质的含量（见图[固体平板扩散法1、3、7 打孔法2、8纸片法4、6管碟法5直接滴样法][]）。
1932年，a.弗莱明在研究溶菌酶和青霉素时，开始使用微生物法测定抗生素的活性。1940年，e.b.钱恩等根据平板上抑菌圈的大小测定青霉素的活性含量。后又经e.p.亚伯拉罕等进一步将上述测定方法予以完善。测定抗生素时常用的微生物有大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、啤酒酵母、黑曲霉等。1935年，w.h.肖普费最先用微生物测定维生素b。1939年,e.e.斯内尔和f.m.斯特朗用乳杆菌测定维生素的含量。1934年，k.a.凯肯等用阿拉伯聚糖乳杆菌测定9种氨基酸。此后,乳杆菌属、链球菌属、明串珠菌属的成员及某些微生物的变异株，逐渐成为最常使用的对象。
微生物测定法快速、简便、灵敏度高，在医药、食品等工业中广泛应用。 |